بررسی میزان و اثرات بیان نسبی ژنهای متیل ترانسفراز بر متیلاسیون گلوبال ژنوم اسپرم بیماران الیگواستنوتراتوزواسپرمیا با نقص عملکرد پروتامین قبل و پس از مصرف فولیک اسید

هدف این مطالعه بررسی پارامترهای اسپرمی و کروماتین بدنبال تعادل سطح متیلاسیون ژنوم اسپرم و بهبود بیان متیل ترانسفرازها و پروتامین پس از مصرف فولیک، در مردان با اختلالات اسپرمی شدید است. از میان مردان مراجعه کننده به پژوهشکده علوم تولید مثل یزد تعداد 50 نفر از افرادی که به دنبال درمان ناباروری مراجعه کرده و در آنالیز اسپرمی دارای پارامترهای کمتر از معیار های سازمان بهداشت جهانی و تست پروتامین مختل می باشند به عنوان گروه مداخله انتخاب می شوند و در ادامه به دو گروه تصادفی تقسیم و پس از درمان دارویی مورد بررسی مجدد قرار میگیرند. همچنین تعداد 30 نفر از افرادی که دارای پارامترهای طبیعی و تست پروتامین نرمال می باشند به عنوان گروه کنترل خواهند بود. در گروه مداخله پس از ارزیابی های آندرولوژی و ژنتیکی به طور تصادفی به دو گروه 25 نفر تقسیم و با ویتامین Eو سلنیوم با یا بدون فولیک اسید به مدت دو ماه قرار می گیرند. پس از دو ماه، در بیماران مجددا بررسی های آندرولوژی و ژنتیکی انجام خواهند شد و سپس نتایج حاصل بین گروه ها بررسی خواهد شد. در گروه های مختلف پس از شستشوی نمونه با شیب غلظت، بررسی حیات اسپرمی با ائوزین و تست های سلولی به منظور ارزیابی سلامت کروماتین اسپرم انجام می شود. این تستها شامل انیلین بلو، تولوئیدن بلو و تانل می باشند. جهت بررسی های ژنتیکی، نمونه اسپرمی به روش شستشوی ساده با بافر تهیه، به دو بخش تقسیم و در فریزر 80- نگهداری می شود. پس از تهیه نمونه ها، استخراج RNA طبق پروتکل انجام می شود. در ادامه نمونه ها با PCR Real time مورد بررسی قرار میگیرند.

پژوهشکده علوم تولیدمثل یزد